L'Audiència Nacional es troba regulada al Capítol II, Títol IV, Llibre I, articles 62 a 69 de la Llei Orgànica del Poder Judicial.

L'Audiència Nacional té competències en tres jurisdiccions:

• Penal: els jutjats centrals d’instrucció s’encarreguen d'investigar els delictes de terrorisme, contra la Corona, el narcotràfic a gran escala, els delictes econòmics que causen greu prejudici a l’economia nacional, els comesos per espanyols a l'estranger, així com de les extradicions i euroordres. La Sala Penal s’encarrega de jutjar els delictes anteriors i de revisar les decisions adoptades pels jutjats centrals com a sala d’apel·lació (veure article 65 LOPJ).  En aquest ordre s’inclouen també el jutjat central penal per l'enjudiciament dels delictes amb penes més lleus,  el jutjat central de menors para jutjar delictes de terrorisme      comesos per joves entre 14 i 18 anys, així com el jutjat central de vigilància penitenciària, encarregat del control jurisdiccional dels presos els delictes dels quals siguin competència de l’Audiència Nacional.
• Contenciós-Administratiu:  els jutjats contenciosos–administratius i la Sala Contenciosa–Administrativa coneixen dels recursos que s’interposen contra els actes i disposicions de l’Administració Pública (veure article 66 LOPJ).
• Social: La Sala Social s’encarrega, fonamentalment, de les impugnacions de convenis col·lectius d’àmbit territorial superior a una comunitat autònoma o que vagin a tenir efecte en l’àmbit territorial superior al d’una comunitat (veure article 67 LOPJ).

La Sala de Govern

La Salade Govern de l'Audiència Nacional és un òrgan de govern intern amb competències governatives.  Entre altres, aprovar les normes de repartiment dels òrgans judicials, elaborar informes sol·licitats pel CGPJ, redactar la memòria anual d’activitats de la institució, proposar magistrats suplents, així com determinades facultats disciplinàries (veure article 106.1 LOPJ).